技術(shù)文章

凝膠成像系統(tǒng)的用途

1、分子量定量。對于常用的DNA膜，利用分子量量化功能在膠上標(biāo)注DNA Marker條帶的已知分子量，自動(dòng)生成擬合曲線，并以此測量未知條帶的分子量。用這種方法得到的結(jié)果比肉眼估計(jì)的結(jié)果要準(zhǔn)確得多。
2、定量密度。測定DNA和RNA濃度常用的方法是紫外吸收法，但只能測定樣品中總核苷酸濃度，不能區(qū)分不同長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件，先標(biāo)定DNA膠片上某個(gè)已知DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶的密度，然后方便點(diǎn)擊其他未知條帶，通過與已知條帶的密度對比，即可得到未知DNA含量。該方法也適用于測定PAGE蛋白膠帶的濃度。
3、密度掃描。在分子生物學(xué)和生物工程的研究中，常用的方法是計(jì)算蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物在整個(gè)細(xì)菌蛋白質(zhì)中的百分比。傳統(tǒng)的方法是使用特殊的密度掃描，但這項(xiàng)工作可以通過使用生物分析軟件結(jié)合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)掃描儀直接照射的凝膠成像系統(tǒng)來完成。
4、PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言，與密度掃描類似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

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